植物“隱藏的一半”被可視化和量化是根系研究的關(guān)鍵。為了更好地對(duì)植物地下部分進(jìn)行探索,越來(lái)越多的人對(duì)根箱栽培法培養(yǎng)的植物根系進(jìn)行原位成像,因此,如何更精準(zhǔn)的對(duì)根際圖像進(jìn)行分割,對(duì)后續(xù)的研究至關(guān)重要。
根箱栽培法的成像方式包括RGB成像和高光譜成像,不僅可以對(duì)根箱培養(yǎng)的植株幼苗整體根系進(jìn)行形態(tài)分析,高光譜成像還能夠進(jìn)行土壤和根系的化學(xué)成像?;诖?,北京易科泰有限公司推出了RhizoTron?植物根系高光譜成像系統(tǒng),不僅能進(jìn)行高光譜成像,還可進(jìn)行RGB成像、紅外熱成像、UV-MCF紫外光激發(fā)生物熒光高光譜成像,為根系多角度研究提供非接觸、非損傷、數(shù)字化、可視化解決方案。
圖為RhizoTron植物根系表型成像系統(tǒng)及根盒培養(yǎng)案例
Gernot et.al以甜菜為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,對(duì)根箱培養(yǎng)的甜菜根系進(jìn)行了RGB成像和高光譜成像(900-1700nm)?;赗GB圖像進(jìn)行自動(dòng)分割,基于高光譜圖像的比值光譜指數(shù)(1476nm與1076nm)實(shí)現(xiàn)了根系與土壤的最佳分離。
以手動(dòng)分割作為參考,發(fā)現(xiàn)基于RGB自動(dòng)分割對(duì)根系總根長(zhǎng)進(jìn)行追蹤,其誤差為6.94%,基于高光譜光譜比率分割對(duì)根系總根長(zhǎng)進(jìn)行追蹤,其誤差僅為1.5%。
同時(shí),通過(guò)使用紫外燈(UV)與模擬太陽(yáng)光照射,并采集得到根系可視化圖像,發(fā)現(xiàn)在明亮背景下UV圖像更易識(shí)別根系。
左:RGB原始圖像;中:(A)使用繪圖板手動(dòng)分割根系,(B)頂部分割不良的舊根軸區(qū)域,(C)圖像底部正確分割的新根軸,(D)基于RGB獲得的二值圖像;右:基于高光譜獲得的二值圖像
UV和模擬太陽(yáng)光根系可視化圖像。(A): UV;(B): 模擬太陽(yáng)光
易科泰EcoTech?的實(shí)驗(yàn)室人員以綠蘿為實(shí)驗(yàn)材料,使用RhizoTron?植物根系高光譜成像分析系統(tǒng)采集了根系的400-1000nm高光譜數(shù)據(jù)?;赟pectrAPP?對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,發(fā)現(xiàn)使用Ctr2指數(shù)分割效果最好。
左:SpectrAPP反射高光譜掩膜圖;右:根系參數(shù)圖
[1] Gernot B , Mouhannad A , Alireza N , et al. RGB and Spectral Root Imaging for Plant Phenotyping and Physiological Research: Experimental Setupand Imaging Protocols. [J]. Journal of visualized experiments : JoVE, 2017, (126).