2024年《Physiologia Plantarum》雜志刊登了最新的藻類研究成果:瑞典哥德堡大學(xué)的研究團(tuán)隊利用多通道藻類培養(yǎng)與在線監(jiān)測系統(tǒng)、藻類葉綠素?zé)晒鈨x、藻類光合放氧測量儀等儀器,成功揭示了海洋常見硅藻瑪氏骨條藻Skeletonema marinoi(下文簡寫為S. marinoi)在北歐冬季條件下的生態(tài)適應(yīng)性和工業(yè)潛力。研究發(fā)現(xiàn):在冬季條件下瑪氏骨條藻能夠通過混合營養(yǎng)方式利用甘油等有機(jī)碳源顯著提高其生物量產(chǎn)量,從而展現(xiàn)了其在惡劣環(huán)境中的生長潛力。這項研究不僅為揭示微藻在極端氣候條件下的生物適應(yīng)性提供了新的視角,而且對于微藻在生物技術(shù)和環(huán)境修復(fù)領(lǐng)域(廢水處理、生物固碳等)的應(yīng)用具有重要的指導(dǎo)意義。
這項研究的實(shí)驗過程可總結(jié)為以下三個階段:
階段 1初步篩選培養(yǎng)
首先,研究人員選取了具有高生產(chǎn)力潛力的S. marinoi本地菌株Sm142作為培養(yǎng)和研究對象。在預(yù)培養(yǎng)之后,使用了多通道藻類培養(yǎng)與在線監(jiān)測系統(tǒng)模擬了冬季環(huán)境條件(40μmol photons m?² s?¹、5°C),對不同有機(jī)碳源(甘油、葡萄糖和醋酸)添加條件下的S. marinoi進(jìn)行持續(xù)培養(yǎng),并通過測量光密度、葉綠素?zé)晒夂蜕镔|(zhì)濃度來追蹤微藻的生長。
圖1 不同有機(jī)碳源添加條件下(Photo:光養(yǎng);Mixo (gly):添加10 mM甘油的混合營養(yǎng);Mixo (glu):添加10 mM葡萄糖的混合營養(yǎng);Mixo (ace):添加2.07 mM醋酸的混合營養(yǎng))A:S. marinoi的葉綠素a熒光增長曲線B:生物量產(chǎn)量(顯示甘油顯著提高了S. marinoi的生物量)C:使用多通道藻類培養(yǎng)與在線監(jiān)測系統(tǒng)培養(yǎng)最后一天的照片(顯示了混合營養(yǎng)的藻液顏色比光養(yǎng)的對照組更深,意味著更高的生物量或色素含量)D:顯微成像(顯示甘油可能促進(jìn)了細(xì)胞聚集)
階段2 生理檢測
培養(yǎng)過程中,研究人員使用藻類葉綠素?zé)晒鈨x測量了諸如Fv/Fm(最大光量子產(chǎn)量)、NPQ(非光化學(xué)淬滅)和ETR(電子傳遞速率)等葉綠素?zé)晒鈪?shù);使用藻類光合測量儀測定了光合速率和呼吸速率,從而綜合評估了不同碳源添加對Sm142的生理學(xué)影響。
葉綠素?zé)晒鈪?shù)方面:盡管不同有機(jī)碳源添加下進(jìn)行混合營養(yǎng)的S. marinoi的Fv/Fm和ETR保持一致,表明光系統(tǒng)II的效率沒有受到顯著影響,但與醋酸條件和光養(yǎng)對照條件相比,NPQ在第10天時在甘油和葡萄糖條件下顯著降低。這表明在利用甘油和葡萄糖作為碳源時,S. marinoi可能通過減少能量耗散來調(diào)節(jié)光合作用和暗呼吸過程中的能量分配。
藻類光合參數(shù)方面:結(jié)果顯示甘油添加條件下的凈光合速率和光養(yǎng)對照條件相當(dāng),但暗呼吸速率顯著升高。表明在利用甘油時,S. marinoi細(xì)胞的呼吸活動增強(qiáng),這與觀察到的生物量增加相一致。
結(jié)合兩方面的數(shù)據(jù):S. marinoi在異養(yǎng)條件下,尤其是在有甘油作為碳源時,其光合生理反應(yīng)和代謝活性發(fā)生了變化,這些變化有助于提高其在冬季條件下的生長和生物量生產(chǎn)。
圖2 S. marinoi在不同有機(jī)碳源添加條件下的光合作用參數(shù)A最大量子產(chǎn)量(Fv/Fm);B電子傳遞速率(ETR);C非光化學(xué)淬滅(NPQ)。其中NPQ顯示出顯著差異,表明不同有機(jī)碳源下瑪氏骨條藻能量耗散程度不同
圖3 甘油添加對S. marinoi凈光合速率和呼吸速率的影響。表明S. marinoi在利用甘油時,既維持了光合作用活性,又增強(qiáng)了呼吸活性
階段 3 培養(yǎng)條件優(yōu)化
在第三階段,研究團(tuán)隊進(jìn)一步在光生物反應(yīng)器中模擬瑞典西海岸的冬季條件,以優(yōu)化大規(guī)模培養(yǎng)的條件。他們比較了僅用空氣、添加甘油和空氣、用富含CO2的空氣以及添加甘油和富含CO2的空氣四種不同條件對Sm142生長的影響。實(shí)驗結(jié)果表明,添加甘油和CO2富集空氣的組合條件能顯著提高Sm142的生物量生產(chǎn)力,與僅用空氣的培養(yǎng)條件相比,生物量產(chǎn)量實(shí)現(xiàn)了倍增,這為工業(yè)規(guī)模的微藻培養(yǎng)提供了優(yōu)化的培養(yǎng)條件。
圖4 S. marinoi在自制光生物反應(yīng)器模擬瑞典冬季條件下的異養(yǎng)生長效果。A實(shí)驗所用的光生物反應(yīng)器系統(tǒng)的外觀。B用空氣、添加甘油和空氣、用富含CO2的空氣以及添加甘油和富含CO2的空氣等四種不同條件下S. marinoi的生長曲線。C 四種不同培養(yǎng)條件下的生物量生產(chǎn)力。結(jié)果顯示,無論是僅用富含CO2的空氣或是同時添加甘油和富含CO2的空氣的培養(yǎng)條件,其生物量生產(chǎn)力均顯著高于僅通入空氣的光養(yǎng)條件。
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圖6 AquaPen手持式葉綠素?zé)晒鈨x、MC1000 8通道藻類培養(yǎng)與在線監(jiān)測系統(tǒng)、FMT150藻類培養(yǎng)與在線監(jiān)測系統(tǒng)
參考文獻(xiàn)
Villanova, V. et al. (2024) ‘Unveiling the ecological resilience and industrial potential of Skeletonema marinoi through mixotrophic cultivation in Nordic winter condition’, Physiologia Plantarum, 176(3), p. e14308.